RESUMEN

Para evaluar si el remedio homeopático potenciado Natrum Sulphuricum 200 (Nat Sulph-200) tiene propiedades protectoras contra la carcinogénesis hepática, se indujeron tumores hepáticos en ratones mediante la administración prolongada de la sustancia p-dimetilaminoazobenzeno (p-DAB; inductor de carcinogénesis hepática) y fenobarbital (Fen; promotor). Los ratones de dividieron en cinco subgrupos: alimentados con dieta normal baja en proteínas (grupo 1, controles normales); alimentados con dieta normal baja en proteínas más alcohol-200 (vehículo del remedio homeopático; grupo 2); dieta con una mezcla de 0,06% de p-DAB más 0.05% de fenobarbital (grupo 3); dieta con carcinógenos como la del grupo 3 más alcohol-200 (control positivo para los ratones que recibieron los fármacos; grupo 4) y dieta con carcinógenos como la del grupo 3 más Natrum Sulphuiricum-200 (grupo 5; grupo de intervención). Los ratones se sacrificaron en los días 7, 15, 30, 60, 90 y 120 para el estudio de factores citogenéticos como aberraciones cromosómicas (AC), micronúcleos (MN), índice mitótico (IM) y alteraciones en la cabeza de los espermatozoides (ACE), así como parámetros de toxicidad bioquímica como la aspartato amino-transferasa (AST), alanina amino-transferasa (ALT), fosfatasas ácida (FAc) y alcalina (FAlk), peroxidación lipídica (PL) y disminución del contenido de glutation (Glut). Se observó un número inferior de tumores hepáticos en los ratones del grupo 5 (grupo de intervención que recibió el remedio homeopático). La administración de Nat Sulph-200 redujo el daño genómico y la actividad de la FAc, FAlk, AST, ALT, PL, produciendo a su vez un incremento en el contenido de Glut. Se recomienda, por consiguiente, la replicación de este estudio por parte de otro grupo de investigación.

Palabras clave: inhibición de la carcinogénesis – cáncer hepático inducido por tinturas ácidas remedio homeopático para biomarcadores de genotoxicidad y citotoxicidad - ratones

Introducción

La medicina alternativa y complementaria (CAM) es una de las áreas que ha experimentado mayor expansión en el campo de la sanidad en los últimos tiempos (1-4), especialmente como medicina de apoyo para el tratamiento de enfermedades de difícil curación como el cáncer (5-7). La homeopatía se está convirtiendo en una de las modalidades de tratamiento alternativo más populares (8-10). Su eficacia se ha puesto en tela de juicio en numerosas ocasiones dadas las altas diluciones de la mayoría de remedios homeopáticos potenciados. Sin embargo, nuestros trabajos recientes sobre la eficacia de algunos remedios homeopáticos en la mejoría del cáncer inducido por la sustancia p-dimetilaminoazobenzeno (p-DAB) en ratones (11-14) han despertado un interés para evaluar las posibles propiedades anticancerígenas de otros remedios homeopáticos. La tintura ácida (p-DAB), que se utiliza en ocasiones como aditivo alimentario, puede actuar como iniciador del cáncer hepático cuando se consume de forma crónica (15-19), y sus riesgos para la salud están bien documentados (20-21). Cuando se administra de forma repetida, el fenobarbital (Fen), utilizado fundamentalmente como fármaco antiepiléptico o tranquilizante, presenta efecto carcinogénico en humanos (22), así como en ratones y ratas (23-26). Estos efectos son más acusados cuando el fenobarbital se utiliza en combinación con la tintura ácida, lo que de forma casi infalible suele producir tumores hepáticos que evolucionan hacia una neoplasia (14,15,27). Por lo tanto, este carcinoma hepático inducido representa un buen modelo para el estudio de los eventos ocurridos durante la carcinogénesis, y también para comprobar si un fármaco o remedio presenta algún tipo de propiedades anticancerígenas. Por otra parte, el tratamiento homeopático no presenta ningún efecto secundario conocido y tiene un coste inferior al de los tratamientos convencionales del cáncer hepático, que suele requerir cirugía y cuyo tratamiento farmacológico presenta un elevado coste.

Selección del remedio homeopático:
indicaciones de un estudio piloto

Dado que el órgano diana primario de la carcinogénesis de los compuestos que estamos estudiando es el hígado, hemos estado probando algunos remedios homeopáticos con posibles propiedades hepatoprotectoras o que presentan efectos beneficiosos sobre el hígado (por ejemplo, Chelidonium, Lycopodium, etc.), con la finalidad de evaluar su posible efecto anti-hepatotóxico o anti-carcinogénico.

Uno de estos remedios es la forma potenciada de Natrum Sulphuricum, utilizado habitualmente por los homeópatas para tratar diversas dolencias hepáticas que se acompañan de síntomas relacionados (28). Dado que la administración crónica de p-DAB y fenobarbital (Fen) provoca síntomas de enfermedad hepática y Natrum Sulph es uno de los remedios utilizados para proteger al hígado de dichos efectos tóxicos, llevamos a cabo inicialmente un estudio piloto para valorar la eficacia de Natrum Sulph-30, basado en un número limitado de protocolos (datos no publicados). Dados los resultados positivos obtenidos, se decidió llevar a cabo la presente investigación con el objetivo principal de valorar la eficacia de Natrum Sulph-200 (una potencia más elevada y diluida que presenta un efecto de mayor intensidad y duración) para disminuir la toxicidad inducida por carcinógenos en ratones utilizando varios protocolos de estudio citogenético y bioquímico ampliamente aceptados.

Implicaciones de los parámetros utilizados

Los parámetros evaluados en este estudio representan biomarcadores de genotoxicidad y citotoxicidad (particularmente hepática) significativa, que están implicados de forma directa o indirecta en el desarrollo de tumores hepáticos. Los cambios observados en los estudios citogenéticos promovieron la realización de estudios con peroxidación lipídica (PL), que se asocia con daño tisular y necrosis. De igual forma, el daño tisular y la necrosis pueden ocasionar una disfunción hepática y causar hepatotoxicidad. Por este motivo se seleccionaron diversas pruebas de función hepática, que incluyen algunos encimas hepáticos como la fosfatasa ácida (FAc) y alcalina (FAlk), la aspartato amino-transferasa (AST) y la alanina amino-transferasa (ALT), con la finalidad de valorar el grado de disfunción hepática, en el caso de que éste se produjera. Posteriormente, en caso de que se haya producido hepatotoxicidad, se generarán radicales libres. El Glut presenta propiedades antioxidantes gracias a su capacidad para eliminar radicales libres, y por este motivo se consideró su utilidad en este estudio. Así, mientras que la disminución de los otros parámetros bioquímicos indica disminución de la hepatotoxicidad, dicha disminución debe acompañarse de un incremento paralelo en las concentraciones de Glut.

Métodos

Administración de los carcinógenos y del remedio homeopático a los ratones

Para esta investigación, se crió un línea endogámica de ratones albinos suizos (Mus musculus) en el animalario del Departamento de Zoología de la Universidad de Kalyani, India. Para ello, se obtuvo permiso del Comité de Ética de la universidad y se llevo a cabo una supervisión por parte del Comité para el Bienestar de los Animales. Los ratones de experimentación recibieron comida y agua, y se mantuvieron en condiciones higiénicas. La dieta general estaba compuesta de trigo, grano y leche en polvo sin ningún suplemento proteico animal. Se utilizó un grupo de 36 ratones sanos con un peso de 25-30g para cada una de las series de tratamientos: 1) normal, 2) normal más alcohol 200, 3) p-dimetilaminoazobenzeno (p-DAB) + fenobarbital (Fen), 4) p-DAB + Fen + alcohol 200, 5) p-DAB + Fen + Nat Sulph-200. En nuestros estudios previos utilizamos asimismo otro grupo al que administrábamos únicamente verum + jugo de alcohol. Sin embargo, dada la ausencia de diferencias entre los dos grupos, este último grupo se abandonó para ahorrar vidas animales y disminuir el coste.

Cada grupo de 36 ratones se dividió en 6 grupos diferentes de 6 ratones cada uno, cada uno de los cuales fue fijado en un día diferente según los siguientes intervalos variables: día 15, 30, 60, 90 y 120. El primer grupo de ratones (grupo 1, normal, control negativo) recibió una alimentación normal baja en proteínas. El segundo grupo de ratones (grupo 2) se alimentó con alcohol 200 diluido (potenciado mediante dilución y sucusión) junto con una dieta normal baja en proteínas. El tercer grupo de ratones (grupo 3) recibió la misma dieta pero mezclada con un 0,06% de p-DAB (Sigma, D-6760) a una dosis diaria de 165 mg/kg peso corporal por ratón (15,27,29) y una dosis oral de 0,06 ml de una solución acuosa al 0,05% de Fen por día (14,30) a través de una pipeta fina especialmente construida para este propósito. El cuarto grupo de ratones (grupo 4, control positivo) recibió p-DAB a una concentración del 0,06% junto con solución acuosa al 0,05% de Fen más alcohol 200 diluido (alc-200, ya que el “vehículo” del remedio era alcohol etílico), hasta su sacrificio. El quinto grupo de ratones (grupo 5) fue alimentado con p-DAB más Fen al igual que el grupo 3, pero recibió también Nat Sulph-200 una vez al día hasta que fueron sacrificados en el día 7, 15, 30, 60, 90 y 120.

Administración y dosis

Cada ratón recibió una gota (0,06 ml) de solución de Nat Sulph-200 o alc-200 (en función del grupo) una vez al día, a las 7 de la mañana, con la ayuda de una pipeta fina.

Preparación del remedio potenciado

El remedio homeopático potenciado, Nat Sulph-200, fue proporcionado por “HAPCO”, 165, Bipin Behari Ganguly Street, Kolkata, India. La potencia 200 de Natrum Sulph se extrajo de la tintura madre de sulfato de sodio mediante el procedimiento de dilución y sucusión (31,32), tal y como se recomienda en la Homeopathic Pharmacopoeia de India, Vol. I (33). Dado que el vial de cristal que contenía el alc-200 potenciado que había proporcionado “HAPCO” se rompió de forma accidental durante los primeros del ensayo, se utilizó en su lugar el “placebo” proporcionado por Laboratorios Boiron, Lyon, Francia. No obstante, tras examinar las propiedades físicas de ambos “placebos” preparados por “HAPCO” y “BOIRON” mediante UV, FTIR, fluorescencia, espectroscopía mediante 13 C-NMR y 1H-NMR (34) no se observaron diferencias significativas entre ambos.

Procedimientos de laboratorio

Análisis citogenético

En este estudio, la valoración de la genotoxicidad se llevó a cabo con protocolos citogenéticos estándar y ampliamente utilizados como análisis de aberraciones cromosómicas (AC), micronúcleos (MN), índice mitótico (IM) y alteraciones en la cabeza de los espermatozoides (ACE) (14,26). Se observaron un total de 300 células de la médula ósea en el caso de las aberraciones cromosómicas, 3.000 células para los micronúcleos, 5.000 para en índice mitótico y 5.000 espermatozoides para el análisis para las alteraciones en la cabeza del espermatozoide.

Análisis bioquímico

Tras la extracción de sangre mediante punción ventricular a los ratones anestesiados (aproximadamente 1,5 ml de éter para cada ratón), los ratones fueron sacrificados y su hígado y bazo fueron rápidamente procesados.

En el caso de la determinación de aspartato y alanina amino-transferasas (AST y ALT, respectivamente), fosfatasas ácida y alcalina (FAc y FAlk, respectivamente), peroxidación lipídica (PL) y disminución del contenido de glutation (Glut) se utilizaron los métodos estándar (14).

Análisis Estadístico

El grado de significación de la diferencia en los datos obtenidos con los diferentes grupos se obtuvo mediante el test de la t de Student y mediante un ANOVA de dos vías (Mini Tab 13.01). El experimento se llevo a cabo de forma análoga a la metodología aleatorizada doble ciego controlada con placebo.

Resultados

Crecimiento tumoral

De los 18 ratones sacrificados en los tres intervalos de fijación más largos (es decir, en los días 60, 90 y 120), 15 y 16 ratones presentaron tumores hepáticos en el grupo alimentado con p-DAB + Fen y en el grupo tratado con p-DAB + Fen + alc-200, respectivamente. Un total de 8 ratones presentaron tumores hepáticos en el grupo que recibió el remedio homeopático (Tabla 1).

Cambios en el estado de ánimo

Posteriormente, evaluamos las puntuaciones obtenidas en la POMS. Los resultados muestran que la hostilidad-agresión y la fatiga se redujeron de forma gradual, si bien no se observaron diferencias significativas en rabia-hostilidad entre las puntuaciones obtenidas un mes antes del masaje e inmediatamente después de la quinta sesión y entre las puntuaciones obtenidas un mes antes del masaje con las obtenidas de forma previa a la octava sesión. Se observó una diferencia significativa en agresión-hostilidad entre las puntuaciones evaluadas un mes antes y después del masaje (p<0.05).

Estudios citogenéticos

En comparación con una placa normal en metafase (Fig. 1A), se produjo un incremento tangible en la frecuencia de varios tipos de aberraciones cromosómicas (AC) (Fig. 1B-D) en los diferentes grupos de tratamiento durante todos los periodos de fijación. Se observaron diversos tipos de aberraciones cromosómicas (tanto menores como mayores) en ciertas placas en metafase correspondientes a los ratones de los grupos p-DAB + Fen y p-DAB + Fen + alc-200. La frecuencia total de aberraciones fue máxima en el grupo p-DAB + Fen + alc-200. La frecuencia de aberraciones cromosómicas (AC) fue siempre superior en los ratones alimentados con p-DAB + Fen en comparación con el grupo normal (grupo 1) y el grupo normal + alc-200 (grupo 2). La frecuencia de aberraciones cromosómicas (AC) en el grupo al que se administró p-DAB + Fen + Nat Sulph-200 fue considerablemente inferior (P<0,01–P<0,001) en todos los intervalos de fijación excepto en el día 7 (Fig. 2A).

Eritrocitos micronucleados

La incidencia de micronúcleos (Fig. 1E, que representa un fragmento o un brazo completo de un cromosoma) en los ratones a los que se administró carcinógeno así como en los del grupo de p-DAB + Fen + alc-200 fue sensiblemente superior en comparación con la de los ratones del grupo control en todos los intervalos de fijación. Sin embargo, se observó una disminución significativa en el número de micronúcleos en el grupo de ratones que recibieron el remedio homeopático (P<0,05–P<0,001). Esta disminución se produjo como consecuencia de una reducción en el número de eritrocitos policromáticos y normocromáticos (Fig. 2B).

Índice mitótico

El índice mitótico representa la velocidad por la que las células transitan a lo largo de un ciclo celular. Cuando una célula se transforma en una célula tumoral, esta velocidad se incrementa debido a un fallo en el control de la división celular, y por lo tanto este parámetro se puede utilizar como indicador de carcinogénesis. Los índices mitóticos de los ratones alimentados con p-DAB + Fen o p-DAB + Fen + alc-200 fueron superiores que los de el grupo control. En el grupo alimentado con p-DAB + Fen + Nat Sulph-200 se observó una disminución significativa (P<0,05–P<0,001) en todos los intervalos de fijación excepto en el día 7 (Fig. 2C).

Anomalías en la cabeza de los espermatozoides

Las sustancias genotóxicas, carcinogénicas o espermatotóxicas pueden provocar daños en la cabeza del espermatozoide, los cuales pueden servir como indicadores del riesgo de transmisión del rasgo mutagénico, en el caso de que estos espermatozoides alterados consigan fecundar el ovulo. Se observó un mayor número de espermatozoides con cabezas de morfología anormal (Fig. 1G) en el grupo p-DAB + Fen y el p-DAB + Fen + alc-200 en todos los intervalos de fijación. La cantidad de alteraciones en la cabeza de los espermatozoides observada en el grupo p-DAB + Fen + Nat Sulph-200 fue considerablemente inferior en todos los intervalos de fijación excepto en el día 7 (P<0,05–P<0,001) (Fig. 2D).

Procedimientos bioquímicos

Actividad de la aspartato amino-transferasa (AST)

La actividad hepática de la AST se incrementó tanto en el grupo p-DAB + Fen como en el p-DAB + Fen + alc-200 en todos los intervalos de fijación. Sin embargo, la actividad de la AST en el grupo tratado con el remedio homeopático fue significativamente inferior (P<0,01–P<0,001) a partir del día 15 hasta el 120 (Tabla 2).

Tabla 2. Actividad media de la aspartato amino-transferasa (AST) expresada en (nM/ 100 mg proteína/ Min) en hígado de ratón tratado con p-DAB + Fen, p-DAB + Fen + alc-200, p-DAB + Fen + Nat Sulph-200, grupo normal y controles negativos en diferentes intervalos de fijación. Los diferentes niveles de significación estadística entre dos series dadas se han designado como *, **, ***

*P<0,05, **P<0,01,***P<0,001, n = no significativa.
Los análisis estadísticos se llevaron a cabo entre los grupos p-DAB + Fen + Alcohol y p-DAB + Fen + Nat Sulph-200.
Abreviaturas: p-DAB, p-dimetilaminoazobenzeno; Fen, fenobarbital; Nat Sulph-200, Natrum Sulphuricum-200; EE, error estandar.

Actividad de la alanina amino-transferasa (ALT)

Se observó una tendencia similar en la actividad hepática de la ALT (P<0,01–P<0,001) en el grupo que recibió Nat Sulph-200 en comparación con el grupo p-DAB + Fen + alc-200 en todos los intervalos de fijación excepto en el día 7 (Tabla 3).

Tabla 3. Actividad media de la alanina aminotranferasa (ALT) expresada en (nM/ 100 mg proteína/ Min) en hígado de ratón tratado con p-DAB + Fen, p-DAB + Fen + alc-200, p-DAB + Fen + Nat Sulph-200, grupo normal y controles negativos en diferentes intervalos de fijación. Los diferentes niveles de significación estadística entre dos series dadas se han designado como *, **, ***

*P<0,05, **P<0,01,***P<0,001, n = no significativa.
Los análisis estadísticos se llevaron a cabo entre los grupos p-DAB + Fen + Alcohol y p-DAB + Fen + Nat Sulph-200.
Abreviaturas: p-DAB, p-dimetilaminoazobenzeno; Fen, fenobarbital; Nat Sulph-200, Natrum Sulphuricum-200; EE, error estandar.

Actividad de la fosfatasa ácida (FAc)

La actividad hepática de la FAc presentó una tendencia estable y creciente entre el día 7 y el día 15 en el grupo p-DAB + Fen, para disminuir posteriormente entre los días 60 y 90 y volver a incrementarse en el día 120. Se observó la misma tendencia en el grupo p-DAB + Fen + alc-200. De nuevo, dicha actividad disminuyó de forma significativa (P<0.01); (Tabla 4) en los ratones tratados con Nat Sulph-200 en todos los intervalos de fijación a excepción del día 7.

Tabla 4. Actividad media de la fosfatasa ácida (FAc) expresada en (nM/ 100 mg proteína/ Min) en hígado de ratón tratado con p-DAB + Fen, p-DAB + Fen + alc-200, p-DAB + Fen + Nat Sulph-200, grupo normal y controles negativos en diferentes intervalos de fijación. Los diferentes niveles de significación estadística entre dos series dadas se han designado como *, **, ***

*P<0,05, **P<0,01,***P<0,001, n = no significativa.
Los análisis estadísticos se llevaron a cabo entre los grupos p-DAB + Fen + Alcohol y p-DAB + Fen + Nat Sulph-200.
Abreviaturas: p-DAB, p-dimetilaminoazobenzeno; Fen, fenobarbital; Nat Sulph-200, Natrum Sulphuricum-200; EE, error estandar.

Actividad de la fosfatasa alcalina (FAlk)

La actividad hepática de la FAlk se incrementó en el grupo p-DAB + Fen a partir del día 7 hasta el día 120 disminuyó de forma considerable en el grupo que recibió Nat Sulph-200 (P<0,05–P<0,001) en todos los intervalos de fijación (Tabla 5).

Tabla 5. Actividad media de la fosfatasa alcalina (FAlk) expresada en (nM/ 100 mg proteína/ Min) en hígado de ratón tratado con p-DAB + Fen, p-DAB + Fen + alc-200, p-DAB + Fen + Nat Sulph-200, grupo normal y controles negativos en diferentes intervalos de fijación. Los diferentes niveles de significación estadística entre dos series dadas se han designado como *, **, ***

*P<0,05, **P<0,01,***P<0,001, n = no significativa.
Los análisis estadísticos se llevaron a cabo entre los grupos p-DAB + Fen + Alcohol y p-DAB + Fen + Nat Sulph-200.
Abreviaturas: p-DAB, p-dimetilaminoazobenzeno; Fen, fenobarbital; Nat Sulph-200, Natrum Sulphuricum-200; EE, error estandar.

Peroxidación lipídica (PL)

La PL fue considerablemente superior en el grupo p-DAB + Fen + alc-200. Sin embargo, se observó una disminución significativa (P<0,05–P<0,001) en la PL hepática en el grupo que recibió el remedio Nat Sulph-200 en todos los intervalos de fijación (Tabla 6).

Tabla 6. Actividad media de la peroxidación lipídica (PL) expresada en (nM/ MDA/ mg tejido húmedo) en hígado de ratón tratado con p-DAB + Fen, p-DAB + Fen + alc-200, p-DAB + Fen + Nat Sulph-200, grupo normal y controles negativos en diferentes intervalos de fijación. Los diferentes niveles de significación estadística entre dos series dadas se han designado como *, **, ***

*P<0,05, **P<0,01,***P<0,001, n = no significativa.
Los análisis estadísticos se llevaron a cabo entre los grupos p-DAB + Fen + Alcohol y p-DAB + Fen + Nat Sulph-200.
Abreviaturas: p-DAB, p-dimetilaminoazobenzeno; Fen, fenobarbital; Nat Sulph-200, Natrum Sulphuricum-200; EE, error estandar.

Reducción del contenido de glutatión (Glut)

El contenido de glutation disminuyó en el grupo p-DAB + Fen + alc-200 en todos los intervalos de fijación. Sin embargo, se observó un incremento en el contenido de glutation en el grupo tratado con Nat Sulph-200 en todos los intervalos de fijación (P<0,05 a P<0,01); (Tabla 7).

Tabla 7. Reducción media del contenido de glutation (Glut) (nM/ mg tejido húmedo) en hígado de ratón tratado con p-DAB + Fen, p-DAB + Fen + alc-200, p-DAB + Fen + Nat Sulph-200, grupo normal y controles negativos en diferentes intervalos de fijación. Los diferentes niveles de significación estadística entre dos series dadas se han designado como *, **, ***

*P<0,05, **P<0,01,***P<0,001, n = no significativa.
Los análisis estadísticos se llevaron a cabo entre los grupos p-DAB + Fen + Alcohol y p-DAB + Fen + Nat Sulph-200.
Abreviaturas: p-DAB, p-dimetilaminoazobenzeno; Fen, fenobarbital; Nat Sulph-200, Natrum Sulphuricum-200; EE, error estandar.

Resultado de los análisis estadísticos

El grado de significación estadística de las diferencias en los datos obtenidos en los diferentes grupos se obtuvo mediante la prueba t de Student y los resultados de una prueba ANOVA de dos vías (Mini Tab 13.01), y se recogen en las Tablas 2–7 y en la Tabla 8 y Tabla 9.

Tabla 8. Análisis ANOVA de dos vías para los diferentes parámetros citogenéticos.

*P<0,05

Tabla 9. Análisis ANOVA de dos vías para los diferentes parámetros enzimáticos.

*P<0,05

Discusión

En el presente estudio se han utilizado varios marcadores de toxicidad ampliamente aceptados, todos los cuales presentan un papel significativo durante el proceso de carcinogénesis (14,35-44). La reducción significativa de algunos biomarcadores como AST, ALt, FAc, FAlk y PL y el incremento de Glut en los ratones tratados con el remedio homeopático sugiere que en éstos se produjo una reducción de la hepatotoxicidad y del daño hepático (14,35). También se observó una tendencia positiva en la variación de algunos otros parámetros, como la glucosa sanguínea, el colesterol, la testosterona y el estradiol (datos no mostrados). También se observaron datos que sugieren que el remedio homeopático influyó de forma positiva en la protección de la integridad ultraestructural, como reflejan los datos obtenidos mediante estudios de microscopía electrónica (Fig. 3: escaneado; Fig. 4: transmisión; datos no mostrados). Las especies reactivas del oxígeno o radicales libres se generan por el metabolismo de algunos compuestos exógenos y endógenos que están asociados a la patogénesis de algunos trastornos hepáticos como la cirrosis o el carcinoma hepatocelular (41-44). En la cirrosis y el carcinoma hepatocelular, el sistema antioxidante presenta un daño severo, y el nivel de glutation disminuye, mientras que en las concentraciones de MDA se incrementan y la actividad de los encimas dependientes de glutation se incrementa en el tejido cirrótico y tumoral (43). Los efectos beneficiosos de los preparados homeopáticos sobre el crecimiento del cáncer de próstata en humanos han sido recientemente objeto de estudio por Maclaughlin et al. (45) y Jonas et al., (46), y el extracto crudo de algunas plantas también ha demostrado presentar actividad antitumoral frente a una línea de cáncer de próstata en humanos (47), así como en la carcinogénesis de la piel (48) y en la leucemia y el proceso de envejecimiento en ratones (49).

A lo largo de los últimos años, se ha observado la muerte de células cancerígenas provenientes de tumor cerebral tras la administración del principio homeopático Ruta 6 (50), tanto en organismos in vivo como in vitro. Sin embargo, el mecanismo mediante el cual estas microdosis de remedios homeopáticos altamente diluidos es capaz de provocar estos cambios positivos en diversos parámetros no se conoce todavía en su totalidad. La propiedad del remedio homeopático para disminuir el daño citogenético y para provocar los cambios bioquímicos positivos puede considerarse una prueba de su capacidad para restaurar la normalidad en el funcionamiento de algunos enzimas metabólicos importantes para el organismo y en el mecanismo de reparación y recuperación del genoma, probablemente mediante la activación/desactivación de algunos genes relevantes responsables de la regulación de sus respectivas actividades (51,31,32).

Conclusiones

En comparación con Nat Sulph-30, Nat Sulph-200 mostró resultados ligeramente superiores en cuanto a eficacia en la reducción de la incidencia de tumores hepáticos, así como de otros muchos parámetros medidos con ambas potencias, especialmente tras un periodo de fijación largo. Por consiguiente, animamos a otros investigadores a replicar el siguiente estudio en ratones y/o otros modelos de mamíferos para comprobar si los remedios comprobados de Natrum Sulphuricum podrían ser recomendados como posible tratamiento de apoyo para su uso en la terapia contra el cáncer en el ser humano.


Agradecimientos
Este trabajo recibió el apoyo financiero de una beca EMR de AYUSH, Ministry of Health and Family Welfare, New Delhi para ARKB. Los autores agracen sinceramente al Dr. T.C. Nag, Profesor Asociado, Departmento de Anatomia, All India Institute of Medical Sciences, New Delhi, por su amable ayuda con los estudios de microscopía electrónica. Los autores expresan su sincero agradecimiento al Dr. Philippe Belon, Director de los Laboratorios Boiron, Lyon, France, por proporcionar el remedio Alc-200 para este trabajo.

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